La technique est aujourd'hui essentiellement développée chez les bovins mais applicable à toutes les espèces.
TECHNIQUE
La
collecte des ovocytes se fait par ponction de tous les follicules d'un diamètre supérieur à 2 mm présents sur l'ovaire.
La collecte a lieu :
- Soit après récupération des ovaires à l'abattoir (production "industrielle" d'embryons ou "sauvetage génétique")
- Soit par voie vaginale à l'aide d'un échographe (O.P.U.: Ovum Pick Up)
Tous les ovocytes récupérés sont triés en fonction de leur qualité.
La
maturation des ovocytes s'effectue dans un milieu contenant soit des hormones (FSH, LH, œstrogènes) soit des facteurs de croissance.
Après 24h, les ovocytes sont lavés puis mis dans le milieu de
fécondation avec les spermatozoïdes. Ils restent en contact avec les spermatozoïdes pendant 24h.
Passé ce délai ils sont alors nettoyés puis cultivés pendant 5 ou 6 jours en
coculture avec des cellules de BOEC (cellules d'oviducte de bovin) avant d'être transplantés ou congelés.
RESULTATS
Sur un ovaire, on obtient :
10 à 15 ovocytes collectés qui donneront :
7 à 10 ovocytes fécondés qui donneront :
1 à 2 embryons seront transférables par collecte.
Avec la technique de l'Ovum Pick Up , la donneuse peut être collectée 1 à 2 fois par semaine.
INTERET
Sauvetage génétique
Dans le cas d'un accident ou de maladie incurable, il est possible de récupérer les ovaires d'une vache pour produire des embryons. Dans ce cas, il est recommandé de préparer par injection de prostaglandine quelques receveuses pour éviter d'avoir à congeler les embryons. Cette injection se fait la veille de l'abattage.
Production industrielle
Le procédé consiste à récupérer dans un abattoir un grand nombre d'ovaires de vaches de la même race. Tous les ovocytes ont alors traités ensembles.
Avec les ovaires de 70 à 80 vaches, on obtient environ 1000 ovocytes qui donneront 100 embryons atteignant le stade blastocyte.
Les embryons sont alors congelés par 2 pour augmenter le taux de reprise qui est de l'ordre de 40%.
Ces embryons sont alors utilisés :
- Soit sur des vaches laitières pour leur faire produire des veaux de type limousin, blond d'Aquitaine ou charolais
- Soit sur des vaches ayant des problèmes de fécondité ( Repeat breeding), dans ce cas, le taux moyen de gestation est de l'ordre de 1/3
Ovum Pick Up
La technique permet de prélever tous les 3 ou 4 jours les ovocytes présents dans les follicules ovariens. Le taux de production d'embryons est alors de 1 à 2 par semaine. Malheureusement le taux de gestation de ces embryons après congélation est actuellement insuffisant, il faut donc les transférer frais. Dans ce cas le taux de gestation est alors voisin de celui des embryons frais produits in vivo.
cf. article NIVOT Buiatrie 2002.
